HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室消化条件：

使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育1-2分钟。

显微镜下观察细胞间隙增大、细胞变圆时，立即加入完全培养基终止消化。

轻柔吹打细胞至单细胞悬液，避免过度机械损伤。

传代比例

首次传代建议按1:2比例进行，后续可根据细胞生长状态调整至1:2-1:4。

传代后确保细胞均匀分布于培养瓶/皿中，避免局部密度过高。

培养条件

基础培养基：DMEM + 10%-20%胎牛血清（FBS）+ 1%双抗（青霉素-链霉素）。

环境要求：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

换液周期：每周2-3次，根据培养基pH值及细胞密度调整。

二、细胞复苏流程

复苏前准备

完全培养基预热至37℃。

准备15mL离心管、T25培养瓶、PBS缓冲液等耗材，紫外照射30分钟消毒。

快速解冻

从液氮罐中取出冻存管，立即浸入37℃水浴中，轻摇至剩余米粒大小冰块时终止水浴。

整个解冻过程需在5-10分钟内完成，以减少冰晶损伤。

离心与重悬

将细胞悬液转移至离心管，1000rpm离心3-5分钟。

弃上清，用预热培养基重悬细胞，接种至T25培养瓶或10cm皿中。

补充完全培养基至5-6mL（T25瓶）或12-15mL（10cm皿），置于培养箱培养。

复苏后观察

次日显微镜下检查细胞贴壁情况及密度，及时换液去除死细胞。

三、实验室关键要点

无菌操作

严格遵守无菌规范，避免支原体、细菌、真菌污染。

定期检测支原体，必要时使用双抗预防污染。

细胞状态监测

定期观察细胞形态、密度及培养基pH值变化。

密集培养时，细胞中可见巨大空泡，属正常现象，无需干预。

细胞冻存

冻存液配方：90%血清 + 10% DMSO，现用现配。

程序降温：使用程序降温盒，-80℃冰箱过夜后转入液氮。

冻存密度：1×10⁶-1×10⁷个活细胞/mL。

四、常见问题解决方案

细胞成团脱落

原因：运输振动、室温静置过久、培养基过冷、密度过高。

处理：

轻微脱落：放回培养基继续培养。

严重脱落：收集细胞，重新消化吹散并接种。

预防：使用高贴壁培养瓶或提前包被培养瓶。

细胞漂浮

原因：消化过度、机械损伤、培养基不适。

收集漂浮细胞，离心后用胰酶消化重新接种。

更换高贴壁培养瓶或调整培养基成分。

细胞内/外黑色颗粒

细胞内颗粒：细胞自身特性（如外分泌泡、细胞器折光），无法清除。

细胞外颗粒：细胞碎片或代谢产物，可通过PBS润洗、换液或离心去除。

消化时间控制

四步消化法（针对难消化细胞）：

PBS润洗去除死细胞。

少量培养基吹打贴壁不牢细胞。

胰酶润洗后吸除，再加胰酶消化。

显微镜下观察细胞间隙，分批终止消化。

"HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室

HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室英文别名：:HT-22

消化条件：室温下用胰酶消化1-3分钟。

细胞来源：主要来源于ATCC、ECACC、DSMZ等国际知名细胞库。国内供应商（如南昌全亮科技有限公司(QLCells)等）提供复苏或冻存形式的细胞。

TR-LNN-1 Cells人喉癌淋巴结转移细胞种子库复苏|STR图谱形态特性：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室上皮细胞样

空泡现象：在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

A-9 Cells小鼠皮下结缔组织细胞种子库复苏|STR图谱细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

污染检测：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

U251-LUC Cells人神经胶质细胞瘤细胞种子库复苏|STR图谱生物安全等级：1级。

背景信息：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室详见相关文献介绍

Y3-Ag 1.2.3 Cells大鼠骨髓瘤细胞种子库复苏|STR图谱细胞状态：传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

消化传代：使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

培养观察：定期观察HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。Caov-3 Cells人卵巢腺癌细胞种子库复苏|STR图谱生长特性：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室贴壁生长

传代比例：1:2-1:4(HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室首次传代建议1:2)

PUMC-HUVEC-T1 Cells人脐静脉内皮细胞种子库复苏|STR图谱来源说明：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

细胞传代：传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

RIN-14B Cells大鼠胰岛素瘤细胞种子库复苏|STR图谱培养条件：37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

细胞接收流程：收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。Tu 138 Cells人喉癌细胞种子库复苏|STR图谱血清比例：使用10%-20%的血清浓度有助于优化HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

操作规范：在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

A375-LUC Cells人黑色素瘤细胞种子库复苏|STR图谱细胞复苏：复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

产品包装：复苏发货：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

A7r5 Cells大鼠胸大动脉平滑肌细胞种子库复苏|STR图谱换液周期：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室每周2-3次

污染防控：严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

SU-DHL-8 Cells人B淋巴瘤细胞种子库复苏|STR图谱物种来源：HT22 Cells小鼠海马神经元传代细胞复苏实验室来源于人源、鼠源等其它物种来源

HDF-a细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MDA-330细胞源头种子库、HCC-38细胞源头种子库、MILE SVEN 1细胞

HEK-293F细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长；悬浮生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：Jurkat E6细胞源头种子库、FTC-133细胞源头种子库、COLO 320DM细胞

NS-I/1细胞源头保种库;背景说明：这是P３X６３Ag８(ATCCTIB-９)的一个不分泌克隆。Kappa链合成了但不分泌。能抗０.１mM８-氮杂鸟嘌呤但不能在HAT培养基中生长。据报道它是由于缺失了３-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。;传代方法：１：２传代，３天内可长满。;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：3T3J2细胞源头种子库、WRL-68细胞源头种子库、SNUC2B细胞

P388-D1细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SCL-I细胞源头种子库、SU8686细胞源头种子库、CoCL3细胞

GM02131A细胞源头保种库;背景说明：B淋巴细胞；EBV转化;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：B16/F10细胞源头种子库、PLC-8024细胞源头种子库、MDA MB 453细胞

NCTC 1469 Cells小鼠正常肝细胞种子库复苏|STR图谱┈TEL┈：┈①┈⑤┈②┈七┈零┈九┈零┈⑥┈⑥┈⑨┈⑥┈GL261 Cells小鼠胶质细胞瘤细胞种子库复苏|STR图谱

K32M17细胞低代次复苏|STR图谱

Me17088/1细胞低代次复苏|STR图谱

NH50116细胞低代次复苏|STR图谱

QAU-Ms-E-10c细胞低代次复苏|STR图谱

MOVAS-1 Cells小鼠主动脉平滑肌细胞种子库复苏|STR图谱

HCC-1171细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MCF-10A细胞源头种子库、LNCaP.FGC细胞源头种子库、FDC-P1细胞

HT29细胞源头保种库;背景说明：该细胞是１９６４年由FoghJ用移植培养方法和含１５%FBS的F１２培养液从原发性肿瘤分离的。近来，已建株的培养细胞用含血清的McCoy＇s５a培养基培养。该细胞系在裸鼠中成瘤，也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素；表达尿激酶受体，但没有检测到血浆酶原活性；不表达CD４，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺（HIV的可能替代受体）。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性；p５３基因过表达，并且在２７３位密码子处发;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SW 962细胞源头种子库、OVCA-432细胞源头种子库、HCT_116细胞

Swiss 3T6细胞源头保种库;背景说明：胚胎；成纤维；自发永生；雄性；Swiss albino;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：GM02219D细胞源头种子库、C3H/10T1/2-clone8细胞源头种子库、KM-12细胞

GalK1细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CaEs17细胞源头种子库、T/G HA VSMC细胞源头种子库、MB-49细胞

SHZ-88 Cells大鼠乳腺癌细胞种子库复苏|STR图谱

HEC-1-A Cells人子宫内膜腺癌细胞种子库复苏|STR图谱

lewis-luc Cells小鼠肺癌细胞种子库复苏|STR图谱

CEL细胞源头保种库;背景说明：胚胎；肝 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：FCCH1024细胞源头种子库、U266S细胞源头种子库、H-2342细胞

NCIH196细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：YES 2细胞源头种子库、AZ521细胞源头种子库、ZR75-1细胞

SPB/pEGFP-B2细胞低代次复苏|STR图谱

EA hy 926细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：GM00637B细胞源头种子库、SUDHL-6细胞源头种子库、HS-68细胞

BMF细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：TK10细胞源头种子库、SW 1990细胞源头种子库、N9细胞

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma] Cells人弥漫大B淋巴瘤细胞种子库复苏|STR图谱

SKMel-5细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：６传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：星形的;相关产品有：WC00097细胞源头种子库、Hepatoma-22细胞源头种子库、HL-1细胞

TSCCa细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：UWB1-289细胞源头种子库、Hs 863.T细胞源头种子库、OCI-LY-8细胞

KE-37细胞源头保种库;背景说明：急性T淋巴细胞白血病；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：KE39细胞源头种子库、6-T CEM细胞源头种子库、HM1900细胞

SNU601 Cells人胃癌细胞种子库复苏|STR图谱

ANA-1 [Mouse macrophage] Cells小鼠巨噬细胞种子库复苏|STR图谱

A-549 PRKAB2 KO细胞低代次复苏|STR图谱

UUIGPi001-A细胞低代次复苏|STR图谱

HG01697细胞低代次复苏|STR图谱

QGY-7701细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：消化３-５分钟，１：２,３天内可长满;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：CMT 93细胞源头种子库、CAL 12T细胞源头种子库、U20S细胞

C166 Cells小鼠血管内皮细胞种子库复苏|STR图谱

SNU-81 Cells人结肠腺癌细胞种子库复苏|STR图谱

NCI-H446 Cells人肺癌细胞种子库复苏|STR图谱

OSRC2细胞源头保种库;背景说明：来源于日本人的肾脏肿瘤细胞。 可以移植到裸鼠。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：GL261细胞源头种子库、Hep 3B2.1-7细胞源头种子库、CA-OV-3细胞

H-510细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：８传代；每周换液２次。;生长特性：混合生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：LC-2 ad细胞源头种子库、FHL124细胞源头种子库、SK-BR3细胞

hTERTHME1细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SK-MEL-3细胞源头种子库、PaCa2细胞源头种子库、LY-R细胞

639 V细胞源头保种库;背景说明：膀胱癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CD18细胞源头种子库、V-79-4细胞源头种子库、FCCH1024细胞

NCI-H2122 Cells人非小细胞肺癌细胞种子库复苏|STR图谱

MB49 Cells小鼠膀胱癌细胞种子库复苏|STR图谱

MDA-MB231细胞源头保种库;背景说明：MDA-MB-２３１来自患有转移乳腺腺癌的５１岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中，它能形成低分化腺癌（III级）。;传代方法：消化３-５分钟，１：２,３天内可长满;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SF-126细胞源头种子库、NCI-H1184细胞源头种子库、TW-039细胞

H-292细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：８传代；２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：WEHI164细胞源头种子库、PC3M细胞源头种子库、NCI-H-128细胞

RIN-m5F细胞源头保种库;背景说明：胰岛β细胞瘤；雄性；NEDH;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCIN87细胞源头种子库、CCC-HHM-2细胞源头种子库、639V细胞

COLO-HSR细胞源头保种库;背景说明：该细胞１９８４年建系，源自一位３３岁患有大肠腺癌男性经５-fu治疗后的腹水。;传代方法：１：２传代。３天内可长满。;生长特性：半贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H.Ep. #2细胞源头种子库、HOC1细胞源头种子库、rRTEC细胞

SCC-25细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：１０传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：ZR75-1细胞源头种子库、HUT 28细胞源头种子库、RPMI #1846细胞

NUGC-4 Cells人胃癌细胞种子库复苏|STR图谱

MC3T3-E1 Subclone 14 Cells小鼠颅顶前骨细胞种子库复苏|STR图谱

Ramos (RA 1)细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：hESC细胞源头种子库、K7M2 wt细胞源头种子库、SW-1990细胞

PTK-2细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MHCC97L细胞源头种子库、SUDHL-1细胞源头种子库、Ramos (RA 1)细胞

GM21023细胞低代次复苏|STR图谱

HAP1 LAT (-) 2细胞低代次复苏|STR图谱

MDBK Cells牛肾细胞种子库复苏|STR图谱

L929+GFP Cells小鼠成纤维细胞种子库复苏|STR图谱

LS 123细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４—１：８传代，每周换液２—３次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：LS1034细胞源头种子库、GRSL细胞源头种子库、YTMLC-90细胞

L5178Y TK+/-3.7.2c细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：293S细胞源头种子库、A375mel细胞源头种子库、H4IIEC3细胞

SW1417细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２—１：４传代，每周换液１-２次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：B-16细胞源头种子库、Kuramochi细胞源头种子库、L细胞

KMB-17细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长　;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：TE354T细胞源头种子库、IOSE-80细胞源头种子库、Med 283细胞

H9/HTLV-IIIB Cells人T淋巴瘤白血病细胞种子库复苏|STR图谱

CHO-K1 Cells仓鼠卵巢细胞种子库复苏|STR图谱

TE-15细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：MV4:11细胞源头种子库、CHOS细胞源头种子库、NCI-H820细胞

SNB.19细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长　;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LLC-MK2细胞源头种子库、Alpha Mouse Liver 12细胞源头种子库、KYSE-180细胞

U-373MG ATCC细胞源头保种库;背景说明：胶质瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：IPLB-Sf21-AE细胞源头种子库、A2780-CP细胞源头种子库、HK-2 [Human kidney]细胞

P31-FUJ细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：５传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：801-D细胞源头种子库、HCT 15细胞源头种子库、SL-29细胞

LNCaP Cells人前列腺癌细胞种子库复苏|STR图谱

SVG p12 Cells人脑星形胶质细胞种子库复苏|STR图谱

OV-1063 Cells人卵巢上皮细胞癌细胞种子库复苏|STR图谱

SKNBE(1)细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：WERI-Rb 1细胞源头种子库、HCC-1588细胞源头种子库、NBL_S细胞

ML2细胞源头保种库;背景说明：急性髓单核细胞白血病；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HARA-B细胞源头种子库、H-526细胞源头种子库、SGC996细胞

HOC细胞源头保种库;背景说明：肝；卵圆 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H-2073细胞源头种子库、293S细胞源头种子库、H1648细胞

MPC 11细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：KLE细胞源头种子库、H1105细胞源头种子库、SEG-1细胞

HPSI0115i-qaqp_5细胞低代次复苏|STR图谱

Akata-GFP Cells人淋巴细胞种子库复苏|STR图谱

SCC VII细胞源头保种库;背景说明：鳞状细胞癌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：AN3-CA细胞源头种子库、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞源头种子库、MFE296细胞

OV3121细胞源头保种库;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：BCP-1细胞源头种子库、NCI-BL1339细胞源头种子库、Hs294细胞

ProPakA.6 Cells人胚肾细胞种子库复苏|STR图谱

UMR-106 Cells大鼠骨肉瘤细胞种子库复苏|STR图谱

143B-Luc Cells人骨肉瘤细胞种子库复苏|STR图谱

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